大紅蟹品牌官網(wǎng)訊：羧甲基殼聚糖是殼聚糖羧甲基化的衍生物,因其良好的水溶性而得到廣泛應(yīng)用以及深入研究。
研究表明,羧甲基殼聚糖具有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的作用,并且常常伴隨著低水平的疤痕形成及良好的愈合表觀。細(xì)胞及分子水平的研究表明,該現(xiàn)象很可能與羧甲基殼聚糖通過(guò)合理調(diào)控創(chuàng)傷處膠原合成和分泌有關(guān)。
另外,有研究表明羧甲基殼聚糖促進(jìn)傷口愈合的作用與其分子量的大小密切相關(guān)。迄今為止,關(guān)于羧甲基殼聚糖愈創(chuàng)方面的研究主要停留在對(duì)愈創(chuàng)效果的描述,對(duì)于深入的機(jī)理探討鮮有報(bào)道。
本課題擬在本實(shí)驗(yàn)室前期工作基礎(chǔ)上,繼續(xù)就羧甲基殼聚糖促進(jìn)創(chuàng)傷愈合方面作更深入的研究。 方法:利用酶解法獲得不同分子量的羧甲基殼聚糖,分別在動(dòng)物個(gè)體水平和細(xì)胞水平研究其促進(jìn)傷口愈合的作用,并對(duì)內(nèi)在機(jī)理進(jìn)行初步探討。
動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過(guò)大鼠背部深Ⅱ度燒傷模型研究羧甲基殼聚糖對(duì)傷口愈合的促進(jìn)作用。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒測(cè)定皮膚傷口處的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β1,白細(xì)胞介素(IL)-6和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-1的含量。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)主要研究羧甲基殼聚糖對(duì)傷口重塑的兩種重要的修復(fù)細(xì)胞——成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的影響。成纖維細(xì)胞可以形成肉芽組織、合成前膠原和糖氨聚糖等細(xì)胞外基質(zhì),同時(shí)還可自分泌生長(zhǎng)因子調(diào)控修復(fù)過(guò)程。
巨噬細(xì)胞能吞噬并清除外源性異物和壞死細(xì)胞,還能通過(guò)釋放各種細(xì)胞因子調(diào)節(jié)創(chuàng)傷修復(fù)。創(chuàng)傷后,巨噬細(xì)胞功能的改變將會(huì)影響創(chuàng)面修復(fù)。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,用MTT法研究了羧甲基殼聚糖對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響,用中性紅法檢測(cè)羧甲基殼聚糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響。ELISA試劑盒測(cè)定了成纖維細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素(IL)-8,IL - 10和羥脯氨酸的含量以及巨噬細(xì)胞分泌的腫瘤壞死因子(TNF)-α的含量。
結(jié)果:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,不同分子量的羧甲基殼聚糖均可以顯著促進(jìn)大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面的愈合過(guò)程,顯著縮短愈合時(shí)間(P0.01)。與對(duì)照組比較,羧甲基殼聚糖能夠顯著提高傷口處MMP - 1含量,且羧甲基殼聚糖組TGF-β1和IL -6水平顯著升高。細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)表明,不同分子量的羧甲基殼聚糖都可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖,且分子量越小,促增殖作用越強(qiáng)。羧甲基殼聚糖在不同培養(yǎng)時(shí)間分別刺激成纖維細(xì)胞分泌IL - 8和IL - 10,但對(duì)膠原的分泌量并沒(méi)有影響。IL-8被認(rèn)為可以抑制成纖維細(xì)胞合成和分泌膠原。IL-8含量的變化對(duì)于調(diào)控膠原的適度分泌有重要意義。
在與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)前期,羧甲基殼聚糖促進(jìn)IL-10的分泌,作為一個(gè)重要的抗炎癥因子,IL-10含量的提高對(duì)于調(diào)控或消除創(chuàng)傷處的炎癥反應(yīng)有重要意義。羧甲基殼聚糖還可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力,并提高其對(duì)TNF-α的分泌。
結(jié)論:羧甲基殼聚糖能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖,激活巨噬細(xì)胞,提高TGF-β1和IL- 6的含量,從而促進(jìn)傷口愈合。羧甲基殼聚糖通過(guò)刺激成纖維細(xì)胞分泌IL-8,巨噬細(xì)胞分泌TNF-α和在皮膚傷口處提高M(jìn)MP-1減少膠原分泌,這有助于減少疤痕的形成。羧甲基殼聚糖刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的IL-10與調(diào)控炎癥反應(yīng)有關(guān)。